Что содержится в слюне пиявки

Они препятствуют развитию механизмов свертывания крови, чем обеспечивают свободное истечение крови из поврежденных сосудов. Следует отметить, что в составе секрета слюны пиявки обнаружены вещества, блокирующие все основные механизмы активации системы свертывания крови (первичный и вторичный) К числу соединений этой группы следует отнести следующие:

Калин — ингибитор адгезии и агрегации тромбоцитов, а также активации фактора Виллебранда. Впервые описан R. Munro и соавторами в 1991 году и имеет молекулярную массу в 65 кДа.

Апираза — ингибитор агрегации тромбоцитов инициированной АДФ. Впервые выделена в 1987 году М. Rigbi и соавторами. Описаны две ее изоформы — низко- и высо комолекулярная (45 и более 400 кДа соответственно). Наибольшая активность при рН 7,5. Апираза вызывает гидролиз аденозиновых нуклеотидов (АТФ и АДФ), причем с примерно равной начальной скоростью.

Антагонист PAF (фактора активации тромбоцитов) — препятствует адгезии и активации тромбоцитов, миграции тромбоцитов и нейтрофилов в очаг поражения, а также сокращению гладкомышечных клеток. PAF представляет собой фосфоглицерид, выделяемый в процессе иммунологических реакций нейтрофилами, базофилами и макрофагами, а также в процессе специфической активации тромбоцитов. PAF является мощным медиатором воспаления и, выделяясь в области нанесения ран, инициирует гемостаз и воспалительную реакцию. Антагонист PAFвпервые описали М. Orevuи соавторы (1992).

Ингибитор Ха фактора (FXaI — Factor Ха Inhibitor) — в каскаде белков плазменного гемостаза фактор Ха является ферментом, катализирующим превращение протромбина в тромбин в присутствии ионов Са2+ , фактора свертываниякрови V на поверхности мембран активированных тромбоцитов или фрагментов разрушенных эндотелиальных гладкомышечных клеток (иногда фактор Ха называют протромбиназой). FXaIпервые выделили из разбавленной| слюны медицинской пиявки в 1988 году М. Rigbi и соавторы. Получен и рекомбинантный (искусственный) FxaI, который, как показали опыты на экспериментальных животных, оказывает защитное действие против венозного тромбообразования.

Гирудин — другой полезный фермент, своего рода специфический ингибитор фермента тромбина. Его выделил из экстракта пиявок в 1884 году Хайкрафт. Это вещество замечательно тем, что оно замедляет свертывание крови. Гирудин — уникальный высокоспецифичный ингибитор фермента тромбина, с которым он образует прочный комплекс, тем самым блокирует все известные реакции, активатором в которых выступаеттромбин:

  • активацию фибриногена и превращение его в нерастворимый фибриновый сгусток;
  • регуляцию V, VIII, XIII факторов свертывания;
  • регуляцию компонентов системы комплемента:
  • изменение функционального состоянии клеток крови (моноцитов, нейтрофилов), в том числе и агрегацию тромбоцитов;
  • изменение состояния эндотелиальных и гладкомышечных клеток кровеносных сосудов.

В настоящее время строение и механизм действия гирудина изучены достаточно подробно. Гирудин имеет у пиявки более чем 20 изоформ, различающихся длиной полипептидной цепи и наличием или отсутствием некоторых аминокислотных остатков. Третичная структура ингибитора представлена тремя образованиями: компактным доменом (6

39(в зависимости от изоформы) аминокислотных остатков) вблизи N-конца, образующим так называемое «ядро»; подвижными относительно ядра коротким пептидом (1

5 аминокислотных остатков) и длинным С-концевым хвостовым доменом (40

65(в зависимости от изоформы) аминокислотных остатков). Методами генной инженерии получен рекомбинантный гирудин и фармацевтический препарат на его основе.
Гирудин взаимодействует с тромбином, блокирует два участка его активного центра. Тем самым блокируется доступ субстратов и, в частности фибриногена, к ферменту. За счет большого количества контактов между тромбином и гирудином образующийся комплекс исключительно прочен (константа диссоциации Kd =10-14М). Сродство этих веществ столь высоко, что гирудин ингибирует не только свободный тромбин, но и фермент, связанный с фибриновым сгустком.
В 1940-х годах А.В. Кирсанов и М.Н. Быстрицкая получили препарат гирудина-сырца. Очищенный гирудин был впервые выделен Ф. Марквардтом на основе разработанного им метода фракционирования экстракта из головной области медицинской пиявки. Исключительно высокая специфичность гирудина по отношению к тромбину выгодно отличает его от других природных ингибиторов этого фермента: антитромбина 3, гепарина и ά2 -макроглобулина. По сравнению с рядом синтетических ингибиторов тромбина гирудин представляет собой идеальный ингибитор этого фермента.
Ингибирование активности тромбина, которое проявляется в замедлении или полном блокировании свертывания фибриногена, — не единственная функция гирудина. В его присутствии замедляется реакция активации тромбином факторов свертывания V, VIII, XIII. Гирудин препятствует реакции высвобождения и агрегации тромбоцитов, ингибируя связывание тромбина кровяными пластинками. Он вызывает диссоциацию комплекса тромбина со специфическими белками — рецепторами на тромбоцитах, так как у тромбина сродство к гирудину выше, чем к высокоаффинным рецепторам на тромбоцитах. Гирудин лишает тромбин способности повышать антикоагуляционный и фибринолитический потенциалы крови при внутривенном введении крысам.
Препараты гирудина не токсичны. При внутривенном или подкожном введении растворов этого вещества в дозах, которые значительно превышают терапевтические, никаких местных или общих явлений отравления или других негативных последствий не наблюдается. Однако частично очищенный гирудин вызывает некоторые побочные реакции, например, нарушение сердечной деятельности, дыхания.
Изучением фармакологических и антитромботических свойств гирудина на животных занимался Ф. Марквардт. Для внутривенного введения он использовал высокоочищенный и частично очищенный препараты гирудина. При введении собакам высокоочищенного гирудина частота сердцебиений, ритмика дыхания, артериальное давление в правом и левом желудочках не изменялись. Частично очищенный препарат гирудина вызывал понижение этих показателей. Нормализация деятельности этих систем происходила спустя 60 – 90 минут после внутривенного введения исследуемого препарата. Использование высокоочищенного гирудина не вызывало изменений числа тромбоцитов, уровня фибриногена и гемоглобина крови.
После введения высокоочищенного гирудина животным концентрация его снижалась на 50%. У собак это происходило на 51-й минуте, у кроликов — на 62-й и у крыс — на 66-й. Через час 70% гирудина в биологически активной форме содержалось в моче животных. Полное выведение гирудина с мочой отмечалось через 3 часа. При введении животным гирудин удлиняет общее время свертывания крови, тромбиновое и частичное тромбопластиновое время плазмы крови. Внутривенное введение крысам препаратов гирудина в дозах 2000 и 10 000 ATNIH Ед/кг массы телаполностью блокировало образование тромбов в изолированном участке яремной вены.
Экспериментальные исследования на крысах выявили следующие любопытные факты. Тромбообразование в опытах стимулировали внутривенным введением активированной стеклом сыворотки крови через 10 минут после инъекцирования гирудина. 60-минутный интервал между введением гирудина и сыворотки приводил к блокированию тромбообразования только при использовании высоких доз гирудина (10 000 ATU/кг). Гирудин предупреждал образование микротромбов при диссеминированном внутрисосудистом свертывании крови (ДВС синдром), стимулированном введением животным эндотоксина, препятствовал тромбообразованию, которое было вызвано летальными дозами тромбина. Эти свойства гирудина делают его перспективным для лечения сердечнососудистых заболеваний. Трудности получения этого препарата из пиявок в достаточных количествах препятствуют его широкому использованию в медицине. В настоящее время делаются попытки получения гирудина методами генной инженерии и уже проводятся клинико-фармакологические испытания высокоочищенных препаратов гирудина. При внутривенном или подкожном одноразовом введении гирудина здоровым людям (в дозе 1000 ATU/кг) 50% ингибитора через 24 часа выводится с мочой в активной форме. Наблюдается удлинение тромбинового, частичного тромбопластинового и протромбинового времени плазмы крови. Эти показатели системы свертывания крови нормализуются по мере выведения гирудина из организма. Количество тромбоцитов, уровень фибриногена и фибринолитическая активностьплазмы не изменяются. Не отмечено влияния гирудинана кровяное давление, частоту сердцебиений и дыхания.

Они обеспечивают проникновение веществ слюны, разрушение тканей жертвы, расширение раны, расплавление микрососудов. Кроме того, литические соединения влияют на проницаемость межклеточного матрикса дермы.

Гиалуронидаза – фермент, катализирующий реакции гидролитического расщепления и деполимеризации гиалуроновой кислоты и родственных ей соединений кислых мукополисахаридов. Этот фермент широко распространен в живой природе: в ядах змей и пауков, экстрактах семенников человека, у некоторых бактерий, в экстрактах пиявок. Гиалуронидаза определяет приспособительную особенность пиявок к питанию кровью. Гиалуронидаза облегчает проникновение в организм веществ в результате расщепления гиалуроновой кислоты — одного из компонентов основного вещества соединительной ткани. Полимеры гиалуроновой кислоты играют роль цементирующего агента, который скрепляет отдельные тканевые элементы и клетки. Можно предположить, что гиалуронидаза – вещество, с помощью которого другие биологически активные вещества, входящие в состав слюны медицинских пиявок, проникают в организм хозяина при насасывании крови пиявкой.

Учитывая, что гликозоаминогликаны гиалуроновой кислоты входят в состав базальной мембраны (на которой расположены клетки зародышевого слоя эпидермиса), межклеточного матрикса, а также базальных мембран капилляров, она играет большую роль не только как фактор проникновения, но и в возникновении последующих физиологических реакций. Следует отметить, что в составе слюны пиявки обнаружены две гиалуронидазы. Они отличаются по способности воздействовать на хондроитинсульфат.

Lys изопептидаза впервые была обнаружена в составе секрета слюнных желез Hirudomedicnalisв 1986 году (И.П. Баскова, Г.И. Никонов). Фермент осуществляет свою фибринолитическую (растворение тромбов) активность посредством избирательного гидролиза ε-(γ

глутамил)- лизиновых изопептидных связей, образуемых при стабилизации фибрина в присутствии фактора XIII свертывания крови и образующих поперечные сшивки (кросс-линкинги), обусловливая нетрадиционный механизм фибринолиза.

Дестабилаза представляет собой прочный белок-липидный комплекс кДа, обладает высокой агрегационной способностью. В результате агрегирования мономеров дестабилазы образуется мицелла, способная менять свою пространственную ориентацию в зависимости от природы растворителя или контактирующего субстрата, экспонируя при этом или гидрофильную, или гидрофобную части своей структуры. В результате контакта с кровью мицеллярная структура дестабилазы связывает свободные гирудин и ингибитор калликреина плазмы крови. Так формируется липосома. В водных растворах она проявляет активность всех компонентов ДК(дестабилазного комплекса) (то есть дестабилазы, аналога простациклина, гирудина и ИК), тогда как в органических растворителях демонстрирует активность лишь дестабилазы и аналога простациклина.

Подобная структурная организация дестабилазного комплекса обеспечивает стабилизацию входящих в его состав компонентов. Но этим ее функция не ограничивается. Она облегчает проникновение их путем активного переноса через мембрану клетки (трансмембранный перенос) как при внутривенном, так и пероральном введении экспериментальным животным.

Липосомальная природа ДК обеспечивает важную физиологическую роль этого комплекса как универсального тромболитического агента. Это достигается благодаря следующим факторам:

  • быстрому проникновению ДК через мембрану клетки,
  • прикреплению за счет липидного компонента дестабилазы к поврежденному участку сосудистой стенки и к пристеночному тромбу,
  • медленному лизису фибринового сгустка за счет изо-пептидазной активности дестабилазы,
  • препятствованию дальнейшему тромбообразованию за счет блокады тромбина, калликреина плазмы крови, агрегации и адгезии тромбоцитов.

Таким образом, природная липосома дестабилазного комплекса является агентом, обеспечивающим как профилактическое противотромботическое, так и тромболитическое действие.

– Коллагеназа впервые выделена в 1987 году М. Rigbi и соавторами. Она вызывает гидролиз волокон коллагена I типа и сходна с коллагеназой человека. Возможно, коллагеназа участвует в ингибировании коллаген-индуцированной агрегации тромбоцитов.

Блокаторы защитных реакций организма

В эту группу учеными отнесен ряд веществ полипептидной природы, которые служат ингибиторами ферментов, выделяемых различными клетками организма в ходе ответной реакции на повреждение кожи. В литературе роль этих веществ связывается с ингибированием процессов переваривания белков в кишечнике медицинской пиявки. Высказывается также предположение, что вещества этой группы выполняют защитную функцию, препятствуя повреждению внутренних структур пиявки ферментами, выделяемыми в очаге повреждения и попадающими в кишечник с поглощаемой кровью. Одним из мнений также является то, что в процессе кровоизвлечения они блокируют проявления защитной воспалительной реакции организма (развитие спазма, отека, боли и др.) с целью обеспечения питания животного. Вещества этой группы обнаружены нами в средних и особенно последних фракциях слюны, где они присутствуют в максимальных концентрациях. Некоторые из них (например, гирустазин) имеют значение и для блокирования системы гемостаза.

Бделлины — группа полипептидов с небольшой молекулярной массой, среди которых выделяют бделлины А с молекулярной массой в 7 кДа (в этой группе наиболее изучен бделластазин с молекулярной массой 6,3 к Да) и бделлины В с молекулярной массой в 5 кДа. Методом равновесной хроматографии выделены многочисленные формы бделлинов А и В; они обозначены от А1 до А6 и от В1 до В6. И те, и другие являются сильными ингибиторами трипсина, плазмина и акрозина спермы. Они не блокируют активность химотрипсина, тканевого и плазменного калли-креинов, субтилизина. Впервые их обнаружили Н. Fritz и соавторы в 1969 году. Получена рекомбинантная форма бделластазина.

Гирустазин – относится к тому же семейству антистазиновых ингибиторов сериновых протеаз. Выделен в 1994 году из экстрактов медицинской пиявки. Молекулярная масса гирустазина — 5,9 кДа. Он ингибирует тканевой калликреин (но не плазменный), трипсин, химотрипсин и катепсин G ней-трофилов. Способность гирустазина блокировать тканевой калликреин — очень важное свойство, так как последний катализирует высвобождение высокоактивных кининов. Кини-ны через специфические рецепторы на клетках-мишенях модулируют широкий спектр биологических активностей, в том числе участвуют в поддержании нормального кровяного давления. Гирустазин также получен в рекомбинантной форме.

LDTI (LeechDerivedTryptaseIngibitor) – ингибитор триптазы, полученный из экстракта медицинских пиявок. Триптаза является основным компонентом секреторных цитоплазматических гранул тучных клеток и приводит к разрушению белков экстраклеточного матрикса. Известна важная роль триптазы при аллергических и воспалительных реакциях. Как и для многих уже описанных соединений, создан рекомбинантный LDTI.

LCI (LeechCarboxypeptidaseIngibitor) – ингибитор карбоксипептидазы А. Выделен в 1998 году и имеет две изо-формы с молекулярными массами 7,3 и 7,2 кДа. Устойчив в широком диапазоне рН и температур. Так как этот ингибитор находится в составе секрета слюнных желез медицинской пиявки, можно предположить, что он может блокировать гидролиз кининов металлопротеиназами в месте прокусывания пиявкой кожи, тем самым усиливая индуцированное кининами увеличение кровотока. Создан рекомбинантный LCI.

Эглины – низкомолекулярные белки из экстрактов медицинской пиявки с молекулярными массами 8,073 и 8,099 кДа («b» и «с» формы соответственно). Впервые их описали в 1977 году U. Seemuller и соавторы. Игибируют активность α-химотрипсина, химазы тучных клеток, субтилизина и протеиназ нейтрофилов, эластазы и катепсина G. Имеют высокую устойчивость к денатурации и прогреванию. Ингибиторный спектр эглина «с» позволяет считать его одним из важнейших пртивовоспалительных агентов.

Эти ингибиторы трипсина и плазмина впервые были обнаружены в 1969 году в коммерческих препаратах гирудина, которые обладали способностью ингибировать активность плазмина и трипсина. Они представляют собой полипептиды с молекулярной массой -7000 D (группа А) и 5600 D(группа В). Бделлины также ингибируют активность акрозина, образуя с этими ферментами неактивный эквимолярный комплекс.

К числу других полезных веществ, которые таит в себе слюна пиявки, можно отнести эглины. Впервые они обнаружены в составе коммерческих препаратов гирудина наряду с бделлинами. Они представляют группу полипептидов с молекулярной массой 6600—6800 D. Эглины ингибируют а-химотрипсин, субтилизин и нейтральные протеазы гранулоцитов человека: эластазу и катепсин G, и образуют с этими протеазами прочные комплексные соединения.

При некоторых патологических состояниях организма наблюдается повышение активности катепсинов в животных тканях. Это связано с высвобождением ферментов из лизосом. Эластаза и катепсин G относятся к группе сериновых протеаз, активных в нейтральной среде. Эластаза, гидролизующая эластин, и катепсин G выделены из полиморфно-ядерных лейкоцитов, макрофагов и других клеток. Они расщепляют протеогликаны, коллаген и ряд других белков. В норме катепсины обособлены от внутриклеточных белков в лизосомах. При повреждении тканей, а также под влиянием ряда факторов (некоторых гормонов, токсинов, иммунных комплексов) происходит выход катепсинов из клеток. Нейтральные протеазы гранулоцитов человека вовлекаются в деградацию ткани, растворимые протеазы активируют свертывающие и комплементарные факторы и таким образом, повышают воспалительный ответ при различных патологических состояниях. Ингибиторы этих протеаз способны уменьшать воспалительный ответ. Биологическая ценность этих ингибиторов зависит от их способности блокировать активность лейкоцитарных протеаз, выделяемых при воспалениях.

Еще одна удивительная составляющая слюны пиявки — это гистаминоподобное вещество. Поскольку в литературе отсутствуют сведения о его природе, трудно судить о биологической роли гистаминоподобного вещества при гирудотерапии. Однако, как отмечалось выше, в месте приставления пиявок наблюдается типичная воспалительная реакция. Очевидно, подобное проявление местного действия секрета пиявок можно отнести на счет гистаминоподобного вещества.

Гирудотерапия – лечение пиявками. Продажа пиявок. Обучение гирудотерапии.

Nav view search

Навигация

Искать

Поиск по сайту

Сеанс гирудотерапии у Вас дома.

Квалифицированно. Результативно. Безопасно.

СКИДКА 20% 30% 50%

Продажа медицинских пиявок Hirudo medicinalis

от 40 руб

с БЕСПЛАТНОЙ доставкой по Санкт Петербургу

отправляем Почтой во все регионы РФ

Статьи о лечении заболеваний с помощью пиявок

Энциклопедия медицинской пиявки

Последние отзывы о Гирудотерапии

Бог предусмотрел для человека не только болезни, но и средства врачевания

Молитва о здравии
О Господь мой, Создатель мой, прошу помощи Твоей, даруй исцеление рабе божьей /рабу божьему/ (имя), омой кровь ее /его/ лучами Твоими. Только с помощью Твоею придет исцеление ей /ему/. Прикоснись к ней /нему/ силою чудотворною, благослови все пути ее /его/ ко спасению, выздоровлению, исцелению. Подаришь телу ее /его/ здравие, душе ее /его/ – благословенную легкость, сердцу ее /его/ – бальзам божественный. Боль отступит, и силы вернутся, и раны заживут ее /его/ телесные и душевные, и придет помощь Твоя. Лучи Твои с Небес дойдут до нее /него/, дадут ей /ему/ защиту, благословят на исцеление от недугов ее /его/, укрепят веру ее /его/. Да услышит молитву сию Господь. Слава и благодарность силе Господа. Аминь.

Как лечит пиявка – биохимия секрета слюны пиявки.

Гиалуронидаза

Гиалуронидаза — фермент, катализирующий реакции гидролитического расщепления и деполимеризации гиалуроновой кислоты и родственных ей соединений — кислых мукополисахаридов. Этот фермент широко распространен в живой природе: в ядах змей и пауков, экстрактах семенников человека, у некоторых бактерий, в экстрактах пиявок. Гиалуронидаза определяет приспособительную особенность пиявок к питанию кровью. Как известно, гиалуронидаза служит так называемым фактором распространения, изменяющим степень гидратации тканей, транспорт воды и различных ионов. Она облегчает проникновение в организм различных веществ, увеличивая проницаемость тканей, стенок капилляров в результате деполимеризации и расщепления гиалуроновой кислоты — одного из компонентов основного вещества соединительной ткани, выполняющего роль цементирующего агента, который скрепляет отдельные тканевые элементы и клетки. Можно предположить, что гиалуронидаза — тот вектор, с помощью которого другие биологически активные вещества , входящие в состав секрета слюнных желез медицинских пиявок, проникают в организм «хозяина» при насасывании крови пиявкой .

Гистаминоподобное вещество

Гистаминоподобное вещество содержится в секрете слюнных желез пиявок. Поскольку в литературе отсутствуют сведения о природе этого вещества, трудно судить о его биологической роли при гирудотерапии . Однако, как отмечалось выше, в месте приставления пиявок наблюдается типичная воспалительная реакция. Очевидно, такое проявление местного действия секрета пиявок можно отнести на счет гистаминоподобного вещества.

Гирудин

В 1884 г. из экстракта пиявок Хайкрафт впервые выделил вещество, замедляющее свертывание крови, позднее названное гирудином. До открытия гепарина экстракты из головной части пиявок широко использовались в качестве антикоагулянта. В 40-х годах Кирсанов и Быстрицкая получили препарат гирудина-сырца. Очищенный гирудин был впервые выделен Марквардтом на основе разработанного им метода фракционирования экстракта из головной области медицинской пиявки . В опытах in vitro и in vivo было показано, что гирудин, будучи специфическим ингибитором фермента тромбина, образует с тромбином неактивный прочный нековалентный стехиометрический комплекс с константой диссоциации 6,3·10-13 М. Исключительно высокая специфичность гирудина по отношению к тромбину выгодно отличает его от других природных ингибиторов этого фермента: антитромбина Ш, гепарина и a2-макроглобулина. По сравнению с рядом синтетических ингибиторов тромбина, гирудин представляет собой идеальный ингибитор этого фермента.

Ингибирование активности тромбина, проявляющееся в замедлении или полном блокировании свертывания фибриногена — не единственная функция гирудина. В его присутствии замедляется реакция активации тромбином факторов свертывания V, VIII, ХIII. Гирудин препятствует реакции высвобождения и агрегации тромбоцитов, ингибируя связывание тромбина кровяными пластинками. Гирудин вызывает диссоциацию комплекса тромбина со специфическими белками – рецепторами на тромбоцитах, так как у тромбина сродство к гирудину выше, чем к высокоаффинным рецепторам на тромбоцитах. Он лишает тромбин способности повышать антикоагуляционный и фибринолитический потенциалы крови.

Наблюдается удлинение тромбинового, частичного тромбопластинового и протромбинового времени плазмы крови. Эти показатели системы свертывания крови нормализуются по мере выведения гирудина из организма. Количество тромбоцитов, уровень фибриногена и фибринолитическая активность плазмы не изменяются. Не отмечено влияния гирудина на кровяное давление, частоту сердцебиений и дыхания.
Окисление дисульфидных связей приводит к потере антитромбиновой активности гирудина. Химическое модифицирование свободных карбоксильных групп в гирудине резко снижает его сродство к тромбину. Это свидетельствует о том, что при комплексообразовании гирудина с тромбином реализуются ионные взаимодействия между молекулами.

Псевдогирудин

При выделении гирудина из цельных медицинских пиявок ему сопутствует неактивный компонент из туловищ пиявок, названный псевдогирудином. В отличие от гирудина, содержащего на N-конце изолейцин, псевдогирудин содержит на N-конце валин.
По аминокислотному составу псевдогирудин несколько отличается от гирудина. Гирудин характеризуется более высоким содержанием аспарагиновой и глутаминовой кислот, лизина, изолейцина и тирозина. Содержание цистеина в псевдогирудине в 3 раза ниже, чем в гирудине.

Бделлины

Бделлины — ингибиторы трипсина и плазмина — впервые были обнаружены в 1969 г. в коммерческих препаратах гирудина, которые обладали способностью ингибировать амидолитическую активность плазмина и трипсина.

Эглины

Эглины впервые обнаружены в составе коммерческих препаратов гирудина наряду с бделлинами. Они представляют группу полипептидов с молекулярной массой 6600-6800 D. Эглины ингибируют a-химотрипсин, субтилизин и нейтральные протеазы гранулоцитов человека: эластазу и катепсин G и образуют с этими протеазами прочные комплексные соединения с константами диссоциации

(2-3)· 10-10 М.
Эглины получены в чистом виде, и их состав и физико-химические свойства достаточно хорошо изучены. В первичной структуре эглина С насчитывается 70 аминокислотных остатков, особенность их заключается в отсутствии дисульфидных связей и остатков метионина, изолейцина и триптофана.

Дестабилазный комплекс

Дестабилаза e-(g-Glu)-Lys изопептидаза впервые была обнаружена в составе секрета слюнных желез Hirudo medicinalis в 1986 году. Фермент осуществляет свою фибринолитическую (тромболитическую) активность посредством гидролиза изопептидных связей, образуемых при стабилизации фибрина в присутствии фактора XIII свертывания крови, обусловливая нетрадиционный механизм фибринолиза.

Дестабилаза способна образовывать агрегаты, которые благодаря липидному компоненту могут изменять свою пространственную ориентацию. В пользу этого свидетельствует тот факт, что дестабилаза проявляет свои свойства (т.е. гидролиз изопептидных связей) как в водных, так и в органических растворителях. Образуемые в растворе агрегаты дестабилазы, приобретают свойства мицеллы, способной в зависимости от физико-химических свойств растворителя менять свою пространственную ориентацию, экспонируя или гидрофильную, или гидрофобную части своей структуры.

Однако противотромботический потенциал дестабилазы трудно объяснить лишь блокадой агрегации тромбоцитов, обусловленной аналогом простациклина — липидным компонентом дестабилазы. При анализе влияния дестабилазы на параметры свертывания крови показано, что в ее присутствии значительно удлиняются тромбиновое время и время рекальцификации плазмы крови. Естественно предположить, что подобное действие обеспечивается гирудином и ингибитором калликреина плазмы крови, которые и были обнаружены в препаратах дестабилазы.

Обращает на себя внимание тот факт, что всем препаратам дестабилазы, выделенным различными методами, а также подвергнутым электрофорезу в полиакриламидном геле в денатурирующих условиях, гельфильтрации через Sephadex G-50 и G-75, термической обработке, щелочному гидролизу, экстракции органическими растворителями, сопутствует активность гирудина и ингибитора калликреина плазмы крови.
Дестабилаза представляет собой довольно прочный комплекс, содержащий дестабилазный и простагландиновый компоненты, гирудин и ингибитор калликреина плазмы крови, который можно назвать «дестабилазный комплекс». О прочности этого комплекса свидетельствует тот факт, что распространенными методами биохимии разрушить его не удается. Естественно, что профилактический антитромботический эффект дестабилазы обусловлен как блокадой внутреннего механизма свертывания крови (ингибирование адгезии и агрегации тромбоцитов и активности калликреина плазмы крови), так и антитромбиновой активностью гирудина.
Проникновение дестабилазного комплекса в кровь осуществляется двумя механизмами: обычный транспорт по межклеточным контактам (пассивный перенос) и трансмембранный (активный перенос) транспорт, т.е. через мембрану клеток за счет встраивания в структуру мембраны. А это возможно для такого высокомолекулярного комплекса лишь в том случае, если он обладает свойствами липосомы. Возможность дестабилазного комплекса менять свою пространственную ориентацию в зависимости от природы растворителя наглядно демонстрируется при анализе активностей компонентов комплекса при переходе из водной фазы в органическую и наоборот. В водной фазе все компоненты дестабилазного комплекса проявляют свою активность, тогда как в этилацетате только активность дестабилазы (амидазная) и простагландина (блокада агрегации тромбоцитов); при обратном переводе комплекса в водную фазу проявляют свою активность все компоненты. Таким образом, способность дестабилазы агрегировать в мицеллы, а также связывать гирудин и ингибитор калликреина обеспечивают дестабилазному комплексу свойства и структуру липосомы.

Весь гирудин и ингибитор калликреина плазмы крови находятся в связанном состоянии, т.е. в составе липосомы, и лишь в бактерии-симбионте пиявок эти вещества находятся в свободном состоянии.
Выделить компоненты дестабилазного комплекса в гомогенном состоянии возможно лишь в результате разрушения полипептидной цепи дестабилазы. В этом случае освобождаются простагландиновый компонент дестабилазы, гирудин и ингибитор калликреина плазмы крови.

Характеристика простагландинового (липидного) компонента дестабилазы:
– подобно простациклину ингибирует агрегацию тромбоцитов, стимулированную тромбином, Са2+-ионофором, АДФ, арахидоновой кислотой. Обладает гипотензивным действием, как при внутривенном, так и при оральном введении спонтанно гипертензивным животным.Гирудин выделен в гомогенном состоянии. Его активность и поведение соответствуют гирудину, выделенному по методу Марквардта.

Характеристика ингибитора калликреина плазмы крови. Особый интерес представляет ИК, который в свободном состоянии проявляет свойства, не обнаруживаемые в составе липосомы (ДК). В результате разрушения липосомы ИК проявляет способность ингибировать трипсин.

Таким образом, дестабилаза, представляющая собой прочный белок-липидный комплекс, обладает высокой агрегационной способностью. В результате агрегирования мономеров дестабилазы образуется мицелла, способная менять свою пространственную ориентацию в зависимости от природы растворителя или контактирующего субстрата, — экспонируя при этом или гидрофильную, или гидрофобную части своей структуры. В результате контакта с кровью мицеллярная структура дестабилазы связывает свободные гирудин и ингибитор калликреина плазмы крови, образуя липосому, которая в водных растворителях проявляет активность всех компонентов ДК (т.е. дестабилазы, аналога простациклина, гирудина и ИК), тогда как в органических растворителях демонстрирует активность лишь дестабилазы и аналога простациклина. Мономерной формой липосомы является фракция ДК с ММ 25 kD.

Подобная структурная организация ДК обеспечивает не только стабилизацию входящих в его состав компонентов, но и облегчает проникновение их путем активного переноса через мембрану клетки (трансмембранный перенос) как при внутривенном, так и пероральном введении экспериментальным животным.
Липосомальная природа ДК обеспечивает и важную физиологическую роль этого комплекса, как универсального тромболитического агента: быстрое проникновение ДК через мембрану клетки, прикрепление за счет липидного компонента дестабилазы к поврежденному участку сосудистой стенки и к пристеночному тромбу, медленный лизис фибринового сгустка за счет изопептидазной активности дестабилазы и препятствование дальнейшему тромбообразованию за счет блокады тромбина, калликреина плазмы крови, агрегации и адгезии тромбоцитов. Таким образом, природная липосома – ДК является агентом, обеспечивающим как профилактическое противотромботическое, так и тромболитическое действие.

Гидрофильная часть дестабилазы связана с цепями гирудина и ИК, которые аллостерически модифицируют активный центр дестабилазы и формируют в пространстве участок связывания с лизином. Связывание ИК и дестабилазы происходит в области связывания субстратов активных центров. Активный центр дестабилазы находится в непосредственной близости от липидной части молекулы, что обеспечивает проявление активности в разнополярных растворителях.

Учитывая изложенное выше, можно сделать следующее заключение. БАВ, продуцируемые медицинскими пиявками , обеспечивают:

противотромботическое действие, т.е. блокируют тромбоцитарно-сосудистое и плазменное звенья внутреннего механизма свертывания крови, а также плазменное звено гемостатического процесса на более поздних стадиях его развития и таким образом, препятствуют тромбообразованию;

тромболитическое действие; интересен механизм растворения тромбов: БАВ воздействуют только на сформировавшиеся («старые») фибриновые сгустки, в которых полимеры фибрина прошиты изопептидными связями. Существует гипотеза, что дестабилазный комплекс адсорбируется и на новообразующихся («молодых») тромбах, стимулируя их прочное закрепление на сосудистой стенке и быструю стабилизацию; и лишь впоследствии начиная плавное растворение сформированного тромба;

гипотензивное действие, вернее «нормотензивное» действие; обусловленное, в первую очередь, низкомолекулярными веществами простагландиновой природы, кстати, впервые обнаруженными в медицинских пиявках . Парадоксальность подобного воздействия определяется тем, что БАВ, продуцируемые медицинскими пиявками , приводят к норме повышенное или пониженное значения артериального давления. Механизм действия в настоящее время изучается, однако, можно предположить, что снижение давления обусловлено стабильным аналогом простациклина, повышение же – веществами, обладающими кининазной активностью (природа этих веществ в настоящее время не идентифицирована);

репаративное воздействие на поврежденную стенку кровеносного сосуда; восстановление атромбогенной поверхности кровеносного русла;

антиатерогенное действие; БАВ активно вмешиваются в процессы обмена липидов, приводя его к нормальным условиям функционирования, снижают уровень холестерина и триглицеридов в крови, обеспечивают регресс атероматозных бляшек;

антигипоксическое действие; т.е. повышение процента выживаемости в условиях пониженного содержания кислорода (гипоксия), что является немаловажным фактором для вынашивания плода при беременности, осложненной рядом патологических процессов;

иммуностимулирующее действие; активизация защитных функций организма обеспечивается воздействием на уровне системы комплимента; отмечено также и повышение фагоцитарной активности крови после сеанса гирудотерапии , что обеспечивает противовоспалительное действие пиявок, наряду с ингибиторным (по отношению к эластазе, катепсину G и другим нейтральным протеазам гранулоцитов) потенциалом;

аналгезирующее действие; обезболивание, как в месте постановки пиявок, так и общеорганного действия.

Только верное мнение

Именно этим объясняется успешное лечение пиявками в гинекологии. Такая же ситуация и с пиявками. Слюна пиявки содержит сложный состав химических биологически активных веществ. Специфические биологические вещества, содержащиеся в слюне пиявки. Другим интересным веществом, обнаруженным в слюне пиявок, является фермент коллагеназа.

Под воздействием данного вещества в крови человека снижается уровень холестерина. Прежде чем назначать пиявки, польза и вред их должны быть разъяснены пациентке. В последнее время большое распространение в гинекологической практике получила такая методика лечения. Часто возникает правомерный вопрос, почему для терапевтического воздействия используются именно пиявки.

Пиявок ставят на определенные участки тела. Точки постановки пиявок называются акупунктурными. В результате этого происходит воздействие на определенные нервные окончания, а через них опосредованно и на пораженные органы пациента.

В чем оно заключается? Прокусывая кожу, пиявка начинает отсасывать кровь и лимфатическую жидкость. Это стимулирует работу лимфатической ткани и приводит к увеличению в кровотоке лимфоцитов. Именно это разнообразие и дает возможность применять данных животных в терапии различных патологических процессов человеческого организма.

Пиявки за счет наличия в слюне брадикардинов способны купировать воспалительные процессы различной локализации. В состав слюны входит целый комплекс веществ, способных оказать тромболитическое действие.

Этот вопрос задается довольно часто при назначении данного вида лечения в гинекологической практике. При этом точки постановки пиявок могут располагаться, как на коже в нижней абдоминальной области или половых губах и анусе, так и в самом влагалище. Ведь всем известно, что данные животные в основном проживают в непроточных водоемах. Для медицинских целей используют специально выращенных животных, а не выловленных в близлежащем пруду. Их растят на биологических фермах с соблюдением особых мер бактериологической защиты.

Необходимо знать, что каждая такая пиявка используется только однократно, а после применения подлежит утилизации, как и любое одноразовое медицинское оборудование. Известно, что интенсивный запах отпугивает пиявок.

Что содержит слюна пиявки?

Если пациентку беспокоят появившиеся после применения пиявки в гинекологии небольшие следы от их укуса, то любой врач может успокоить. Ведь все следы от такого лечения проходят бесследно в течение последующего месяца.

Заболевание, как правило, сопровождается венозным застоем в малом тазу, нарушением менструального цикла, а при более тяжелом течении может развиться бесплодие. Как правило, гирудотерапия в гинекологии в этом случае назначается не более 5 процедур. При болезненных месячных терапию пиявками тоже можно использовать. Данный симптом может беспокоить женщину в результате воспаления или гормонального дисбаланса.

Конечно, фибромиому или эндометрии таким способом не излечить, однако специалисты указывают на значительное снижение болевых ощущений и частоты кровотечений после использования пиявок. Такой метод лечения часто рекомендуется в период климактерических изменений в женском организме. Специалисты отмечают улучшение фолликулообразования в яичниках после проведенного курса терапии.

Куда ставят пиявки и где их берут?

Конечно, не отрицается возможность инфицирования пациента патогенными микроорганизмами при использовании пиявки. Она может проявиться в виде раздражения или зуда в области укуса. Тогда от такой методики необходимо отказаться. Для того чтобы оценить при лечении пиявками пользу и вред, врачи рекомендуют пройти предварительный комплекс обследований.

Необходимо удостоверится в отсутствии инфекций с парентеральным механизмом передачи. Пиявочный секрет (слюна пиявки) как лекарствоНа сегодняшний день почти полностью изучены компоненты, входящие в состав секрета слюнных желёз пиявки, являющиеся ферментами полипептидами.

Апираза повышает активность фермента липопротеидлипазы, в результате чего в крови человека понижается уровень общего холестерина и беталипопротеидов низкой плотности. Современные исследования подтвердили, что именно эти вещества способствуют образованию атеросклеротических бляшек в кровеносных сосудах.

Гирудин – фермент, разжижающий кровь и обладающий противосвертывающим действием. Попадая в кровеносное русло вместе со слюной пиявки, он тут же взаимодействует с ферментом тромбином, образуя с ним неактивный комплекс. Внутривенное введение очищенного препарата дестабилазы в эксперименте приводит к растворению тромба.

Практически они представляют собой комплексный лекарственный препарат, в который входят: гирудин, дестабилаза, гиалуронидаза, бделлины, простагландины, эглины и другие биологически активные вещества. Другими словами, секрет слюнных желез пиявки, содержащий весь этот набор энзимов, способен оказывать профилактическое и лечебное действие при угрозе тромбоза.

На фотографии ауры до постановки пиявок наблюдались разрывы в свечении и короткие лучи биополя, через полчаса после постановки пиявок фотография показала восстановление биополя человека. Теперь, вооружившись знаниями о механизме свертывания крови, пора вернуться к чудодейственной слюне медицинских пиявок. 153 мг чистого гирудина удалось получить только из 5 тыс. пиявок! В чистом виде его выделил немецкий ученый Ф.Марквардт.

В общем, это немного, поскольку некоторые белки включают 100–200 аминокислот (правильнее говорить «аминокислотных остатков»). Дело не в размере белка гирудина, а в его специфичном взаимодействии с ферментом тромбином. В результате нити фибрина не образуются и кровь не свертывается, поскольку в ней не могут образоваться сгустки.

Помимо гирудина слюна медицинских пиявок содержит более 80 биологически активных веществ, из которых стоит упомянуть гиалуронидазу. Этот фермент разрушает «шубу» из полисахаридов, которой покрыта поверхность почти каждой клетки, облегчая тем самым доступ к клеткам различных лекарств и биологически активных веществ.

Она способна разрушать длинные нити белка коллагена, который обычно заполняет большие раны в процессе их заживления. Именно из коллагена состоят келоидные рубцы, остающиеся на коже в результате серьезных ожогов или глубоких порезов. Коллагеназу, полученную из других источников, нередко используют в современной косметологии. Неудивительно, что слюна пиявок может, в частности, способствовать рассасыванию спаек, блокирующих проходимость маточных труб у женщин.

К наиболее изученным ферментам относятся:Апираза – чрезвычайно важный фермент секрета слюны пиявок. Пиявки в гинекологии могут устанавливаться как на кожные покровы, так и внутрь влагалища. Приобретать пиявок для сеансов гирудотерапии следует только в аптеках. Как и любой медицинский лекарственный препарат, пиявка в состоянии вызвать аллергическую реакцию. Использование пиявок купирует венозный и лимфатический застой в половых органах пациентки.

Добавить комментарий

Ваш e-mail не будет опубликован. Обязательные поля помечены *

Adblock detector